原代細胞分離培養都有哪幾種方法？

　　研究中常用的細胞系/株系是現成的，我們只需要進行細胞傳代和種子保存。然而，這些細胞系往往因長期體外培養而失去原有的生物學特性，對藥物治療的反應差距越來越大。因此，越來越多的人選擇原代細胞。來源于胚胎、組織、器官和外周血，經特殊分離方法制備的原代培養細胞稱為原代細胞。原代細胞培養，也稱為原代培養，是從供體獲得的組織細胞在體外的培養。

　　

　　原代細胞是接近和最能反映體內生長特性的細胞，適用于藥敏試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞分離培養都有哪幾種方法？

　　

　　1、組織培養法

　　

　　組織培養是一種常見、簡單且成功的原代細胞分離培養方法。基本方法是將切下的小組織塊接種到培養瓶（或培養皿）中。瓶壁可預先涂上一層薄薄的膠原蛋白，以利于組織團粘附在瓶壁上，使周圍的細胞沿瓶壁向外生長。

　　

　　2、消化培養法

　　

　　組織消化法是將組織切成小塊（或糊狀），通過酶的生化作用和非酶的化學作用，使細胞間的橋接結構進一步松散，使團塊由團塊變成絮狀。此時，采用機械法用稻草吹散細胞團塊，或在搖瓶中進行電磁攪拌或搖動，使細胞團塊充分分散，制成少量細胞團塊和大量單細胞細胞懸液，接種培養后，細胞易貼壁生長。

　　

　　3、懸浮細胞培養

　　

　　懸浮生長的細胞，如胸水和腹水中的白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、癌細胞和免疫細胞，不需要被消化。可以低速離心分離直接培養，也可以用淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　

　　4、器官培養

　　

　　器官培養是指從供體獲得的器官或組織塊在體外特定環境條件下不進行組織分離的培養，器官培養可以保持器官和組織的相對完整性，可用于觀察細胞之間的連接、排列和相互作用，以及局部環境的生物調節。