T84 人結腸腺癌肺轉移細胞

產品基本信息

產品編號：KMCC-001-0056

細胞名稱：T84 人結腸腺癌肺轉移細胞

英文名稱：Human colon adenocarcinoma lung metastasis cells

別稱：T-84，T 84

種屬來源：人

組織來源：結直腸癌 取材轉移灶： 肺

細胞形態：上皮細胞，多角形

生長特性：貼壁生長

培養基：DMEM/F12 培養基＋5% FBS ＋1% P/S（生長時，這株細胞應維持高密度生長，至少1/4滿）

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：95% *培養液 + 5% DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

T84細胞株是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉移灶建立的可移植人類癌細胞株。 腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續進行移植。在裸鼠身上的移植過程中，細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。 在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。 這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現出緊密連接和橋粒。有很多關于多肽類激素和神經遞質并維持定向電解質傳輸的受體。這株細胞展現了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

產品編號：KMCC-001-0053

細胞名稱：RD 人橫紋肌肉瘤細胞

英文名稱：Human Rhabdomyosarcoma Cells

別稱： R D，RD-2，RD 2，130T，130-T，130 T，TE-32，TE 32，TE32，TE 32.T，Te 32.T，人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞

種屬來源：人

組織來源：肌肉，橫紋肌肉瘤

細胞形態：紡錘形和大的多核細胞

生長特性：貼壁生長

培養基：89% DMEM 培養基 + 10% FBS + 1%雙抗

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細胞凍存液，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

該細胞可能是TE671的母系。可產生肌紅蛋白和肌球蛋白ATPase，可用作病毒檢測。

細胞培養操作

1. 凍存細胞的復蘇

1.1 在超凈臺中取配好的*培養液5ml到15ml離心管中放至室溫備用。

1.2 快速將干冰或液氮保存的細胞株，放入37℃的水浴鍋后不?；蝿觾龃婀?，使其解凍并達到37℃，此過程盡量保持在3分鐘內完成。（備注：此處注意，管身或管內的液氮揮發完后才可放入，否則有炸裂風險）

1.3 將化凍的細胞液快速轉移至上述準備好培養基中，1000rpm 、4min離心收集細胞并傳代，傳代方法如下：

2. 細胞傳代處理

2.1 待長滿瓶底至80%以上時，貼壁細胞棄掉培養瓶中的培養基，用1X PBS洗兩遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培養箱中消化2-3分鐘，直至看到有細胞從瓶底上脫落分離。

2.3 加入2mL*培養基終止消化，輕輕吹打將所有細胞從培養瓶表面吹落并轉移到離心管中，1000rpm 、4min離心收集細胞。

2.4 收集好的細胞用*培養基重懸，并輕輕吹打懸浮，若無特別說明，就按1:2~1:3的比例鋪新的培養瓶，放進培養箱繼續培養（每個細胞培養條件不同，大部分細胞5%CO2、37℃恒溫培養）。

3.細胞凍存處理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的細胞用細胞凍存液（若無特殊說明，一般細胞凍存液成分為：10%血清+80%培養基+10%DMSO）懸浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃過夜，液氮長期的溫度梯度進行保存。

細胞功能研究相關檢測：

2D細胞培養和觀察

3D細胞培養和觀察

原代細胞分離/培養/鑒定

細胞增殖/毒性檢測（MTT 法/CCK8 法）

細胞凋亡檢測（AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法）

細胞周期檢測（PI染料標記流式法）

細胞遷移/侵襲檢測（劃痕法/Transwell法）

流式細胞分選（流式細胞術）

細胞免疫熒光檢測

小管形成實驗（tube formation，體外血管生成實驗）

細胞克隆形成實驗

細胞外泌體分離與鑒定

慢病毒包裝及穩轉株篩選

電生理檢測

個性化細胞實驗（藥物篩選等）

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